技術(shù)文章/ARTICLES

亮發(fā)光桿菌實(shí)驗(yàn)方法   
1、銅柱系統(tǒng)除氧
2、預(yù)還原培養(yǎng)基及稀釋液的制備
      制作預(yù)還原培養(yǎng)基及稀釋液時(shí)，先將配置好的培養(yǎng)基和稀釋液煮沸驅(qū)氧，而后用半定量加樣器趁熱分裝到螺口厭氧試管中，一般瓊脂培養(yǎng)基裝4.5～5.0mL，稀釋液裝9mL，并插入通N2氣的長針頭以排除O2。此時(shí)可以清楚的看到培養(yǎng)基內(nèi)加入的氧化還原指示劑—刃天青由藍(lán)到紅zui后變成無色，說明試管內(nèi)已成為無氧狀態(tài)，然后蓋上螺口的丁烯膠塞及螺蓋，滅菌備用。
3、分離
（1）編號
      取五支無菌水試管，分別用記號筆標(biāo)明10-1、10-2……10-5。
（2）稀釋
      在無菌條件下，用無菌注射器吸取1mL混合均勻的液體樣品，加入裝有預(yù)還原生理鹽水的厭氧試管中，用震蕩器將其混合均勻，制成10-1稀釋液。用無菌注射器吸取1mL10-1稀釋液至另一裝有9mL生理鹽水的厭氧試管中，制成10-2稀釋液。依此進(jìn)行10倍系列稀釋，至10-7，制成不同樣品稀釋液。通常選10-5、10-6、10-7三個(gè)稀釋度進(jìn)行滾管計(jì)數(shù)。
（3）滾管分離
1）滾管
      將無氧無菌的瓊脂培養(yǎng)基在沸水浴中溶化，置46-50℃恒溫的水浴中，待用，用無菌注射器吸取10-4、10-5、10-6三個(gè)稀釋度各0 .1mL，分別注入待用的試管中，然后將其平放于盛有冰水的瓷盤中迅速滾動，帶菌的溶化瓊脂在試管內(nèi)壁會即刻形成凝固層。
2）分離
      生成的亮發(fā)光桿菌落需挑取出來，鏡檢其形態(tài)及純度。如尚未獲得純培養(yǎng)物，需再次稀釋滾管，并再次挑取菌落，直至獲得純培養(yǎng)物為止。待挑取的單菌落預(yù)先在放大鏡下觀察確定，做好標(biāo)記。然后將培養(yǎng)基試管固定于適當(dāng)?shù)闹Ъ苌希蜷_試管膠塞，同時(shí)迅速將氣流適當(dāng)、火焰滅過菌的氮?dú)忾L針頭插入管內(nèi)。同時(shí)，另一液體厭氧管去掉膠塞插入另一滅過菌的通氣針頭。將準(zhǔn)備好的彎頭毛細(xì)管小心插入固體培養(yǎng)基內(nèi)，找準(zhǔn)待挑菌落，輕輕吸取，轉(zhuǎn)移至液體試管內(nèi)，加塞。37℃培養(yǎng)。培養(yǎng)24h或待培養(yǎng)液混濁后檢查已分離培養(yǎng)物的純度。
鄰苯二甲suan丁芐酯-D4 標(biāo)準(zhǔn)品    純品型，有證書，10mg    CDEO-NF014-25mg    呋喃唑酮代謝物的衍生物2-NP-...    25mg    CDCT-C16168010
連*苯/1,2,3-*基苯    1000mg/L;1ml    CDGG-021128-02    1,2-二溴四氟乙烷(Hlon ...    2000mg/L;1ml    CDGG-020869-05
喹氧靈    1000mg/L;1ml    CDGG-031657-02    戊菌唑    1000mg/L;1ml    CDGG-031836-03
奎寧 標(biāo)準(zhǔn)品    純品型，有證書，0.1g    CDDM-M884100-25mg    楊梅素    25mg    CDCT-C16706900
可溶性淀粉    5g    CDGG-010408-08    蔗糖 標(biāo)準(zhǔn)品    25ml    CDCP-CARB-37-5g
糠醛    2000mg/L;2x0.6ml    CDGG-031049-01    呋喃    1000mg/L;1ml    CDGG-031264-02
亮發(fā)光桿菌