技術(shù)文章/ARTICLES

抗體作為實(shí)驗(yàn)試劑已有很多年了。可以發(fā)展專門針對想要抗原的特殊抗體。另外，抗體試劑與抗原相互作用的結(jié)合通常具高親和力，這就使得檢測很少量靶抗原成為可能。典型的靶蛋白是：高度純化的蛋白質(zhì)、糖蛋白、或這些分子復(fù)雜異質(zhì)的混合物（如豚草屬花粉）。

由于抗原結(jié)合區(qū)與效應(yīng)分子的功能決定區(qū)在不同的區(qū)域，所以，免疫球蛋白（Igs）在基因和分子水平實(shí)際上是組合結(jié)構(gòu)。例如，把編碼某一特定恒定區(qū)的基因和許多編碼可變區(qū)的基因中的任何一個相連，這一特定恒定區(qū)介導(dǎo)補(bǔ)體結(jié)合的能力能夠得以維持同時(shí)仍能被地定為靶目標(biāo)。因此，無論是由恒定區(qū)基因決定的防御機(jī)制，還是由許多可變區(qū)基因決定的結(jié)合抗原的特異性，Ig的基因家族都成功地保持了恒定。其中，可變區(qū)基因在進(jìn)化期間已增加了很多，同時(shí)通過基因復(fù)制和體細(xì)胞突變，也擴(kuò)充了許多。

同類抗體（異構(gòu)型），Ig分子的恒定區(qū)中含有共同的肽結(jié)構(gòu)。雖然這些抗體可以與不同的抗原起反應(yīng)，但在免疫測定中，可以用同一抗體試劑檢測他們。例如，與兩種不同變應(yīng)原（如豚草屬花粉和貓的毛皮垢屑）起反應(yīng)的IgE抗體，它們兩者都可以用抗-IgE抗體來檢測。其中，該抗-IgE抗體能與所有IgE分恒定區(qū)的某一肽段特異性地結(jié)合（見后）。在這個例子中，雖然每種抗體都有不同的抗原結(jié)合位點(diǎn)，但它們的ε重鏈恒定區(qū)的某一肽段都能與抗-IgE抗體反應(yīng)。

當(dāng)設(shè)計(jì)一個用抗原或抗體作試劑的免疫測定方法時(shí)，在選擇合適的分析方法方面，zui重要的因素是待測物（抗原或抗體）的濃度。臨床免疫實(shí)驗(yàn)室zui常用的免疫化學(xué)方法有：（1）凝膠沉淀法和比濁法，用于濃度相對比較高的分析物（毫克到微克每毫升）（2）競爭性替代或免疫測定技術(shù)，如放射性免疫測定（RIA）和酶免疫測定（EIA），用于較低濃度的分析物（微克到納克每毫升）。免疫熒光顯微技術(shù)，包括流式細(xì)胞儀，對檢測細(xì)胞表面抗原或完整細(xì)胞內(nèi)某些細(xì)胞漿或細(xì)胞核抗原很有用。各種方法大致的靈敏度限度列在表31-1。如接下來這部分所描述的那樣，各種方法zui終都是以檢測抗原抗體之間的反應(yīng)為根據(jù)。