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    植物ELISA試劑盒的原理和實驗操作步驟說明

    點擊次數:706次  更新時間:2023-01-15
       植物ELISA試劑盒的原理:
      樣品中的游離三聚氰胺與預包被在板子上的三聚氰胺蛋白偶聯(lián)物競爭結合酶標記三聚氰胺抗體,通過洗滌洗掉未結合的酶標記三聚氰胺抗體,再通過酶的專一性顯色劑顯色根據顯色的深淺來判斷樣品中三聚氰胺含量。根據競爭性原理,如果樣品中的游離三聚氰胺量少,則酶標記的三聚氰胺抗體與包被在板子上的三聚氰胺偶聯(lián)物結合的多,顯色深,反之,則顯色淺。檢測時設置標準曲線,通過標準曲線測定樣品中三聚氰胺的含量。
     
      植物ELISA試劑盒的實驗操作步驟如下:
      1、標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可在小試管中進行稀釋。
     
      2、加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
     
      3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
     
      4、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
     
      5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
     
      6、加酶:每孔加入酶標試劑,空白孔除外。
     
      7、溫育:操作同3。
     
      8、洗滌:操作同5。
     
      9、顯色:每孔先加入顯色劑,再加入顯色劑,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
     
      10、終止:每孔加終止液,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
     
      11。、測定:以空白空調零,依序測量各孔的吸光度(OD值),測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
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