抗體溶解方法：

方法一：我們的抗體（凍干粉）已經(jīng)包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐劑，您只需要加入滅菌的雙蒸水就行了。抗體溶解后，置于-20℃保存，分裝后使用，避免反復(fù)凍融，可保證至少1年有效；

方法二：也可以只加入一半體積的雙蒸水，再用一半體積的甘油補足，置于-20℃保存，這樣抗體不會凍，有利于抗體的穩(wěn)定。

后續(xù)試驗時，再使用對應(yīng)的緩沖液稀釋成工作液，即用即配。

我們的抗體（凍干粉），在常溫放置下，至少一個月有效；若在-20℃下保存（推薦），至少三年有效。

抗體

抗體

一抗和二坑的區(qū)別：

第一抗體就是平常所說的抗體，即能和抗原特異性結(jié)合。

第二抗體是能和抗體結(jié)合的，即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。

一抗是針對抗原的抗體，二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當抗原刺激機體產(chǎn)生抗體。也就是說，抗原進入機體刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答，由B細胞可以產(chǎn)生與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì)。

一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團，而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團（底物和二抗）。

一抗：可以特異結(jié)合底物，就是識別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結(jié)合與否用肉眼是看不出來的。

二抗：可以和一抗結(jié)合，并帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發(fā)光或顯色基團），作用是檢測一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發(fā)光或顯色基團），則不需要二抗。但這樣成本很高，因為一種一抗只識別一種底物。所以如今的設(shè)計一般是二抗帶上可檢測標記，再來檢測一抗。而一抗識別底物。這樣，當一抗結(jié)合到底物上，就可以通過二抗檢測出來。

抗體修復(fù)方式：

修復(fù)液：0.01M 枸櫞酸（pH6.0）或者0.05M EDTA（pH8.0）

抗體修復(fù)方法：

方法1：沸水浴修復(fù)，將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境，保持外部沸騰狀態(tài)15min，自然冷卻至室溫；

方法2：微波修復(fù)，將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中，高火5min，停火3min，中火5min，自然冷卻至室溫。