MCF-10A人乳腺上皮細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FBXO27： FBXO27蛋白抗體 rCF, 大鼠心臟成纖維細(xì)胞 Rattus

HPrSMC-c 人類前列腺平滑肌細(xì)胞(HPrSMC) 500,000cells 原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml 兔子細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒 IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml

FBXO4： FBXO4蛋白抗體 CM-H032人食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

A-427(人肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 兔子細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml

FGFR3： 成纖維細(xì)胞生長因子受體3抗體 大鼠神經(jīng)黑質(zhì)細(xì)胞(RNsn)(1×106)

MRas： 原癌基因M-ras抗體 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7

NCI-H520(人肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 A549 [A-549](肺癌細(xì)胞) 大鼠心肌肌鈣蛋白C(TnC)ELISA試劑盒 MIP-1 Delta(Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1 Delta)  小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ 96T

MCP1： 單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體 敘利亞倉鼠肌肉細(xì)胞;GH-M1

IL18 Protein Mouse 重組小鼠 IL18 / IL-18 蛋白 大鼠(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒 L-LDH  大鼠L-鼠乳酸脫氫酶 96T

英文名稱： 抗體 CROT Others Human 人 CROT (474 Leu/Val) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

MCF-10A人乳腺上皮細(xì)胞貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞;PG-4(S+L-) 人泛素連接酶(E3/UBPL)ELISA 試劑盒 Fibulin 1 衰老關(guān)鍵蛋白抗原 0.5mg

HPV16 E6 protein： 人類狀瘤病毒16抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM9803

MCF-7(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA 試劑盒 FOS B FosB抗原 0.5mg

HIF-1 Alpha： 缺氧誘導(dǎo)因子1α 抗體 肝細(xì)胞生長添加物HGS

CCL13 Protein Human 重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 標(biāo)簽) 人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA 試劑盒 FRA2/FOSL2(Fos related/like antigen 2) FOS樣抗原2 0.5mg

注意事項(xiàng)：

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。