K1（GLAG-66）人甲狀腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GDF8： 生長分化因子8抗體 BCHE Others Human 人 BCHE / CHE1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CL-0212SK-Hep-1(人肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人胰腺癌標(biāo)志物CA242ELISA 試劑盒 IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml

phospho-GSK-3 Beta(Ser9)： 0酸化糖原合酶激酶-3β抗體 A549, 人肺癌細(xì)胞系 Human

HCF Pellet 人類心臟成纖維細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HA-h L 人胰原酶(PK)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml

Glu-Glu Tag： Glu-Glu tag抗體 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-Swiss albino

phospho-NRP1(Thr916)： 0酸化神經(jīng)纖毛蛋白1抗體 SERPINB1 Others Human 人 SerpinB1 / ELANH2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

小鼠膀胱上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 SLC/CCL21(Human secondary lymphoid-tissue chemokine)  人二級(jí)淋巴組織趨化因子 96T

NF1： 1型神經(jīng)纖維瘤抗體 EB細(xì)胞，牛胚氣管細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,Ls-174-T細(xì)胞 CM-H077人心室肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

MFI2 Others Mouse 小鼠 MFI2 / CD228 / melanoansferrin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 大鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA 試劑盒 E-Cad(Human E-Cadherin)  人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白 96T

phospho-NF1(Ser2515)： 0酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體 巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基MaM

K1（GLAG-66）人甲狀腺癌細(xì)胞ILVBL： 乙酰乳酸合成酶蛋白抗體 草魚腎細(xì)胞;GIK 人肝癌細(xì)胞，PLC/PRF/5細(xì)胞 NIH:OVCAR-3(卵巢癌細(xì)胞)

IL1RN Others Rat 大鼠 IL-1RA / IL1RN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 人S蛋白100B(S-100B)ELISA試劑盒 SOD2 (superoxide-dimutase-2) 超氧化物歧化酶2抗原 0.5ml

IDH1： 異檸檬酸脫氫酶1抗體 大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-6

H22細(xì)胞，小鼠肝癌細(xì)胞 Neuro-2A(腦神經(jīng)瘤細(xì)胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0909 人STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)ELISA 試劑盒 Somatostatin/GRIH 抗原 0.5mg

IKIP： IKK激酶相互作用蛋白抗體 CTHRC1 Others Human 人 CTHRC1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。